Выделение продуктов пцр из гелей
Выделение продуктов ПЦР из полиакриламидного геля.Отобранные для клонирования фрагменты ДНК вырезали из геля. К ним добавляли 25 мкл буфера для элюции ДНК из ПААГ и инкубировали 15 мин при 37оС. Затем смесь несколько раз замораживали и оттаивали. Инкубировали в течение ночи при 37оС, центрифугировали при 13 тыс. об/мин 5 мин, отбирали супернатант и переосаждали с использованием 3М ацетата натрия - 96% этанола (см. "Материалы и методы", п. 13). Осадок растворяли в бидистиллированой воде и диализовали с помощью специальной мембраны.
Выделение продуктов ПЦР из агарозного геля.
Выделение продуктов ПЦР после электрофореза проводили из 1% легкоплавкой агарозы ("Sigma", США) с помощью системы Wizard® PCR Preps DNA Purification System ("Promega", США) по методике, предложенной фирмой.
Поделиться в соцсетях:
Похожие