Методы определения rh-фактора.

Видео: определение групп крови перекрёстным методом и резус-фактора

На водяной бане.

b. Метод конглютинации с желатиной – агглютинация идет в коллоидной среде – самый точный, по точности равен реакции Кумбса.

c. Экспресс-метод в пробирках без подогрева с 33% раствором полиглюкина.

d. Определение Rh с использованием цоликлонов анти-D-супер. Метод очень удобен. 1 капля цоликлона + 1 капля эритроцитов испыт.- 2 мин = результат, но антитела моноклональные (на Аг D), не выявляются D”u”, может давать слабую агглютинацию. Есть агглютинация – Rh(+), нет агглютинации – Rh(-).

Должна быть инструкция к реактиву, куда его капать.

Если супер-D дает слабую агглютинацию, то ориентироваться на желатину – самый точный метод, но многое зависит от качества желатины (способность к застыванию, если в холод. – не застывает, или если есть хлопья – то пропала), от техники.

Реакция Кумбса – используется в разных случаях: определение группы крови, Rh-фактора, анти-Rh-антител, аутоантител при аутоиммунных гемолитических анемиях. Если направляем на реакцию Кумбса, то нужно писать, для чего конкретно.

Метод с желатиной.

Сухая чистая пробирка, физ. раствор, желатин 10-12% хорошего качества, пипетка, карандаш по стеклу, водяная баня, термометр, увеличительное стекло, стандартные эритроциты Rh(-) и Rh(+), стандартные сыворотки 2-х серий, кровь больного.

Техника: в сухую чистую пробирку (промаркированная) вносим 2 капли стандартной сыворотки (2-х серий в 2 пробирки) + 1 капля крови + 2 капли желатины, встряхиваем-перемешиваем, ставим на водяную баню при t 46-48`С. Время – держать 15-20 минут (в термостате держать 30 минут). Если t ниже, чем 46`С, то будет D”u”.

Снимаем пробирки с водяной бани, добавляем физ. раствор на глаз в зависимости от густоты капли. Если много – не увидим агглютинацию, и если мало – тоже. Закрываем пробирку пальцем и 2 раза переворачиваем. Если на прозрачном фоне агглютинация – то Rh(+), если нет агглютинации – то Rh(-).

Контроль испыт. крови – прямая эритроцитарная проба в желатине:

2 капли эритроцитов + 2капли желатины.

Экспресс-метод с 33% полиглюкином.

1 капля универсального реагента (33% полиглюкина) + 1 капля крови = 3 минуты переворачиваем, + физ. раствор (5-6 мл) – читаем результат. Есть агглютинация – Rh(+), нет агглютинации – Rh(-).<< ПредыдушаяСледующая >>
Внимание, только СЕГОДНЯ!